การตรวจหาเชื้อ Acidovorax citrulli ด้วยเทคนิค Co-operational polymerase chain reaction เพื่อตรวจรับรองสุขอนามัยของเมล็ดพันธุ์แตงโม Detection of Acidovorax citrulli by Co-operational Polymerase Chain Reaction for Seed Health Testing of Watermelon Seed
บทคัดย่อ
โรคผลเน่าของแตงที่เกิดจากเชื้อแบคทีเรีย (Bacterial fruit blotch of cucurbits) มีสาเหตุจากเชื้อแบคทีเรีย Acidovorax citrulli เป็นเชื้อโรคที่สำคัญต่อการผลิตเมล็ดพันธุ์พืชตระกูลแตง เนื่องจากเชื้อสามารถติดไปกับเมล็ดพันธุ์ (seed borne) และถ่ายทอดโรคผ่านเมล็ดได้ เป็นต้นเหตุการแพร่ระบาดโรคไปยังแหล่งปลูกอื่น ๆ เทคนิคที่มีมาตรฐาน มีความจำเพาะ และความไวในการตรวจหาเชื้อนี้ จึงมีความสำคัญในการใช้เป็นเครื่องมือในระบบรับรองสุขอนามัยของเมล็ดพันธุ์ เพื่อลดแหล่งปฐมภูมิของเชื้อ A. citrulli ที่จะไปแพร่กระจายในแหล่งปลูก และให้เป็นไปตามมาตรฐานการส่งออก การศึกษานี้เพื่อประเมินถึงประสิทธิภาพของเทคนิค Co-operational polymerase chain reaction (Co-PCR) ในการตรวจหาเชื้อ A. citrulli ในเมล็ดพันธุ์แตงโม โดยนำน้ำแช่เมล็ดมากรองด้วยแผ่นกรองแบคทีเรียร่วมกับการสกัดดีเอ็นเอ และตรวจหาเชื้อด้วยเทคนิค Co-PCR พบว่า สามารถตรวจหาเชื้อ A. citrulli ในเมล็ดพันธุ์ที่มีการปลูกเชื้อไว้ในอัตราเมล็ดติดเชื้อ 0.05% และ 0.01% ที่มีการปลูกเชื้อในเมล็ดด้วยอัตราต่ำสุดที่ประมาณ 103 CFU/เมล็ดและวิธีนี้สามารถใช้ตรวจหาเชื้อ A. citrulli จากเมล็ดแตงโมที่ติดเชื้อในสภาพธรรมชาติได้
