การเพิ่มประสิทธิภาพการใช้เทคนิค Co-PCR ในการตรวจหาเชื้อ Acidovorax citrulli สาเหตุโรคผลเน่าในเมล็ดแตงโม

บทคัดย่อ
การตรวจหาเชื้อ Acidovorax citrulli (Ac) ด้วยเทคนิค Co-PCR โดยใช้ชุดไพรเมอร์ 521 ที่พัฒนาเพื่อเพิ่มประสิทธิภาพในการศึกษานี้ ประกอบด้วยไพรเมอร์ 4 เส้น ได้แก่ AC-ORF12F และ AC-ORF1F4 ที่ความเข้มข้น 0.4 µM  และไพรเมอร์ AC-ORF13R และ AC-ORF3F3 ที่ความเข้มข้น 0.2 µM ที่อุณหภูมิ annealing 72 o C ทำให้มีความจำเพาะ และความไวในการตรวจดีเอ็นเอของเชื้อเป้าหมายได้ต่ำสุด 1 pg การตรวจหาเชื้อในกองเมล็ดพันธุ์ พบว่า มีความไวในการตรวจเชื้อในกองเมล็ดที่อัตราปนเปื้อน 0.01% มีการปนเปื้อนเชื้อเริ่มต้น 37  colony forming unit (CFU)} โดยที่อัตราการปนเปื้อนเดียวกันนี้ ตรวจหาเชื้อ Ac ไม่พบตามวิธีการมาตรฐานสากลของ ISHI-Veg